La concentración teórica máxima de masa celular seca se calcula multiplicando la fracción de volumen celular compactado máximo por la densidad celular húmeda y la fracción de sólidos secos. Utilizando una fracción de volumen celular máxima del 60%, una densidad celular húmeda de 1,1 g/cm³ y un 25% de sólidos secos, el resultado es 165 g de peso celular seco por litro de volumen del fermentador.
El cálculo es un límite físico de empaquetamiento, no un objetivo operativo normal:
DCW máximo = fracción de volumen celular × densidad celular húmeda × fracción seca
= 0,60 × 1.100 g/L × 0,25 = 165 g DCW/L.
Cómo se deriva el máximo
Establecer el volumen celular disponible
Las células densamente empaquetadas no pueden ocupar todo el volumen del fermentador porque quedan espacios llenos de líquido entre ellas. La suposición de referencia es que el líquido intersticial ocupa al menos el 40% del volumen.
Por lo tanto, la fracción máxima ocupada por células húmedas es:
[ \phi_{\text{húmedo}} = 1 - 0,40 = 0,60 ]
Esto significa que, bajo el límite de empaquetamiento asumido, las células húmedas pueden ocupar como máximo el 60% de cada litro.
Convertir el volumen celular a masa celular húmeda
La masa celular húmeda se calcula utilizando la densidad celular húmeda:
[ C_{\text{húmedo,máx}} = \phi_{\text{húmedo}}\rho_{\text{húmedo}} ]
Para una densidad celular húmeda de:
[ 1,1\ \text{g/cm}^3 = 1.100\ \text{g/L} ]
la concentración máxima de células húmedas es:
[ C_{\text{húmedo,máx}} = 0,60 \times 1.100 ]
[ C_{\text{húmedo,máx}} = 660\ \text{g células húmedas/L} ]
Convertir la masa húmeda a peso celular seco (DCW)
La biomasa microbiana se aproxima comúnmente como 25% de sólidos secos y 75% de agua. La aplicación de la fracción seca da:
[ C_{\text{DCW,máx}} = C_{\text{húmedo,máx}}f_{\text{seco}} ]
[ C_{\text{DCW,máx}} = 660 \times 0,25 ]
[ \boxed{C_{\text{DCW,máx}} = 165\ \text{g DCW/L}} ]
Este es el máximo teórico bajo las suposiciones establecidas.
El cálculo general
Fórmula central
La expresión general es:
[ \boxed{ C_{\text{DCW,máx}}
\phi_{\text{húmedo}} \times \rho_{\text{húmedo}} \times f_{\text{seco}} } ]
Donde:
- (C_{\text{DCW,máx}}) es la concentración teórica máxima de peso celular seco.
- (\phi_{\text{húmedo}}) es la fracción de volumen celular húmedo máximo.
- (\rho_{\text{húmedo}}) es la densidad celular húmeda.
- (f_{\text{seco}}) es la fracción de biomasa húmeda que corresponde a sólidos secos.
Si se conoce la fracción de vacío mínima, calcule:
[ \phi_{\text{húmedo}} = 1 - \phi_{\text{vacío}} ]
Consistencia de unidades
La densidad debe expresarse en unidades compatibles con la concentración deseada. Dado que:
[ 1\ \text{cm}^3 = 1\ \text{mL} ]
y:
[ 1\ \text{g/cm}^3 = 1.000\ \text{g/L} ]
una densidad húmeda de 1,1 g/cm³ se convierte en 1.100 g/L antes de ser utilizada en la ecuación.
Ejemplo para una planta piloto
Para un fermentador con un volumen de trabajo de 100 L, la masa celular seca total teórica correspondiente sería:
[ 100\ \text{L} \times 165\ \text{g DCW/L}
16.500\ \text{g DCW} ]
[ \boxed{16,5\ \text{kg DCW}} ]
Este cálculo estima la biomasa seca total solo cuando todo el volumen indicado se trata como volumen de fermentador a la concentración máxima asumida.
Qué representa este límite
Un límite físico de empaquetamiento
El resultado está determinado por el volumen celular, la densidad celular, el contenido de agua y el espacio requerido entre las células. Describe cuánta biomasa seca podría ocupar teóricamente el recipiente si las células se acercaran a un estado de empaquetamiento máximo idealizado.
Por lo tanto, se entiende mejor como un límite superior geométrico y composicional.
No es un rendimiento de sustrato
Este cálculo no determina cuánta biomasa se puede producir a partir de glucosa, amoníaco u otro sustrato. El rendimiento de biomasa basado en el sustrato es una restricción separada regida por el balance de carbono, la disponibilidad de nitrógeno, los requisitos energéticos y la termodinámica.
Un proceso puede alcanzar su límite de rendimiento de sustrato mucho antes de acercarse al límite de empaquetamiento físico.
No es un cálculo de productividad
El límite de concentración tampoco especifica qué tan rápido se puede producir la biomasa. En un reactor continuo, la productividad volumétrica de biomasa se expresa comúnmente como:
[ P_X = D X ]
donde (D) es la tasa de dilución y (X) es la concentración de biomasa.
La tasa de dilución debe permanecer compatible con la cinética de crecimiento y evitar el lavado (washout), independientemente de la concentración máxima teórica.
Comprender las compensaciones
El empaquetamiento ideal no es una fermentación normal
Un caldo de fermentación bien mezclado no es equivalente a un lecho estático de células muy compactadas. La agitación, las burbujas de gas, la viscosidad, la morfología, el cizallamiento y la circulación del líquido afectan la concentración alcanzable.
Por lo tanto, la suposición del 60% de volumen celular debe tratarse como un límite idealizado en lugar de un punto operativo rutinario de planta piloto.
La composición celular varía
La fracción de sólidos secos del 25% es una aproximación. El valor real cambia según el organismo, la fase de crecimiento, el sustrato, las condiciones osmóticas y el método de medición.
Si la fracción seca medida es del 20% en lugar del 25%, las mismas suposiciones de empaquetamiento y densidad darían:
[ 0,60 \times 1.100 \times 0,20
132\ \text{g DCW/L} ]
La base de densidad y volumen importa
Los sistemas de fermentación distinguen entre el volumen total del recipiente, el volumen de trabajo, el volumen de líquido y el volumen de caldo cosechado. Aplicar el resultado a la base de volumen incorrecta puede sobreestimar la capacidad total de biomasa.
Los cálculos de la planta piloto deben indicar claramente si la concentración se informa por litro de caldo de trabajo o por litro de capacidad del fermentador.
La transferencia de oxígeno puede volverse limitante
A altas concentraciones celulares, la demanda de oxígeno y la eliminación de dióxido de carbono pueden restringir el crecimiento antes de que el empaquetamiento físico se vuelva relevante. La mezcla y la eliminación de calor también pueden volverse limitantes a medida que aumenta la viscosidad del caldo.
Estas restricciones de ingeniería hacen que el máximo físico sea un punto de referencia para el análisis de viabilidad, no un punto final garantizado del proceso.
Cómo aplicar esto a su proyecto
Utilice primero el cálculo físico y luego compárelo con las restricciones biológicas y de los equipos.
- Si su enfoque principal es estimar el techo de concentración absoluta: Multiplique la fracción máxima de células húmedas por la densidad celular húmeda y la fracción de sólidos secos; las suposiciones establecidas producen 165 g DCW/L.
- Si su enfoque principal es dimensionar una cosecha de planta piloto o una unidad de procesamiento posterior: Multiplique la concentración estimada por el volumen de trabajo real, teniendo en cuenta la diferencia entre el volumen de trabajo y la capacidad total del recipiente.
- Si su enfoque principal es predecir el rendimiento de fermentación alcanzable: Trate el resultado del empaquetamiento solo como un límite superior y evalúe por separado el rendimiento del sustrato, la transferencia de oxígeno, la mezcla, la eliminación de calor, la viscosidad y el riesgo de lavado.
- Si su enfoque principal es mejorar la precisión del cálculo: Reemplace la fracción de vacío asumida del 40%, la densidad húmeda de 1,1 g/cm³ y la fracción seca del 25% con mediciones específicas para el organismo y las condiciones operativas.
La concentración máxima teórica de células secas es, por lo tanto, 165 g DCW/L bajo las suposiciones establecidas, mientras que la concentración alcanzable en la planta piloto debe establecerse mediante límites biológicos y de ingeniería.
Tabla de resumen:
| Parámetro o concepto | Valor / Fórmula | Significado |
|---|---|---|
| Fracción de volumen celular húmedo máximo | 60% | Basado en una fracción de vacío intersticial mínima del 40% |
| Densidad celular húmeda | 1,1 g/cm³ = 1.100 g/L | Convierte el volumen celular en masa de biomasa húmeda |
| Fracción de sólidos secos | 25% | Representa la porción seca de la biomasa húmeda |
| Concentración máxima de células húmedas | 0,60 × 1.100 = 660 g/L | Concentración teórica de biomasa húmeda |
| Concentración máxima de peso celular seco | 0,60 × 1.100 × 0,25 = 165 g DCW/L | Límite superior de empaquetamiento físico y composición |
| Biomasa seca total a 100 L | 100 × 165 = 16,5 kg DCW | Aplica la concentración al volumen de trabajo del fermentador |
| Principales límites prácticos | Transferencia de oxígeno, mezcla, eliminación de calor, viscosidad, morfología y rendimiento de sustrato | Las concentraciones operativas reales suelen ser inferiores al máximo físico |
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